NML研究论文 | 多重蛋白检测：基于上转换荧光编码微球

图文导读

▶ 图1 PEGDA的光交联机理 

a) UV引发的光引发剂解离产生自由基; b) 链增长阶段，自由基攻击PEGDA中的双键形成新的自由基; c) 链转移; d) 自由基的不同组合形成稳定的不活泼产物，从而导致链终止。

▶ 图2 UCNPS合成及编码微球的表面改性

a) 分散于环己烷中NaYF4:50％Yb1％Er（红色）和NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu（绿色）UCNPs的流体动力学尺寸和尺寸分布; b,c) NaYF4:50％Yb1％Er和d,e) 分散于环己烷中的NaYF4:18％Yb2％Er30％LuUCNP的TEM图像; f) NaYF4:50％Yb1％Er（上图）和NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu（下图）UCNPs的发射荧光光谱，内插图(i,ii)是对应的照片; g)分散在水中的羧基改性的NaYF4:50％Yb1％Er(红色)和NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu（绿色）UCNPs流体动力学尺寸和尺寸分布;羧基改性的h,i )NaYF4:50％Yb1％Er和j,k )NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu分散在水中的UCNPs的TEM图像。l) 羧基修饰NaYF4:50％Yb1％Er（上图）和NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu（下图）UCNPs插图（i，ii）的发射荧光光谱为对应的照片。

▶ 图3 通过微流控液滴法合成多色UCNPs编码微球

a) 液滴微流体装置的AutoCAD设计；b) 微流控液滴合成微球的机理；c, d) 使用微流体装置产生水凝胶的明场显微镜图像；e, f) 在10倍和20倍放大倍数交联水凝胶后形成的微珠的明场显微镜图像；g) 在微流体通道中以不同流速的油形成水凝胶；h) 相应微球的明场显微镜图像（在40倍放大，曝光=10ms，增益=4x）；i) 在不同的油流量下形成的微球直径；j) 对应的图表显示与不同油流量的关系（数据代表平均值±SD; n = 50个微球）。

▶ 图4 羧基改性后编码微球的明场显微镜图像及其相应的荧光显微镜图像

用羧基改性的NaYF4:50％Yb, 1％Er和NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu UCNPs编码微球的明场显微镜图像及其相应的荧光显微镜图像（在40倍放大下）。比例分别为a, f) 1:0; b, g) 0.67:0.33; c, h ) 0.5:0.5; d, i)0.33:0.67和e, j) 0:1; k)从每个微球（顶部）计算得到的红色和绿色强度比率 （底部）（数据代表平均值±SD; n = 20个微珠）。

▶ 图5 用于标记报告抗体的UCNPs的合成及表面修饰

a) 在环己烷和水中羧基改性和未改性的NaYF4:30％Yb0.5％Tm UCNPs的尺寸分布；b) 在环己烷中的NaYF4:30%Yb0.5%TmUCNPs的TEM图像; c) 在水中的NaYF4:30%Yb0.5%Tm@carboxyl UCNPs的TEM图; d)NaYF4:30％Yb0.5％Tm UCNPs的发射荧光光谱，分别在环己烷和水中表面改性和未改性，插图(i)NaYF4:30％Yb0.5％Tm(ii)NaYF4:30％Yb0.5％Tm羧基UCNP相应的照片。

▶ 图6 UCNPs-共轭报告抗体的制备

a) 在不同浓度的UCNPs下，UCNPs-Ab共轭物的不同表面电荷；b) 表面电荷对UCNPs-Ab共轭物中UCNPs浓度的图像；c, e)明场图像( 不添加UCNPs-Ab和添加UCNPs-Ab )；d, f)荧光显微镜图像（放大倍数为40倍,不添加UCNPs-Ab和添加UCNPs-Ab ）；g) 在结合反应中使用不同浓度UCNPs的UCNPs-Ab对应的S/N比 （数据代表平均值±SD; n = 20个微球）。

▶ 图7 多色UCNPs编码球基三明治免疫分析

明场图像和相应的开放式过滤器和用于收集蓝色发射过滤器的荧光显微镜图像（放大倍数为40倍）。a, b,c) 不添加目标HSA蛋白（对照）和d, e, f)添加目标HSA蛋白；g) 添加和不添加用于检测的靶蛋白编码微球的R/B强度比的图（数据表示平均值±SD; n = 20个微珠）;h) 定量检测目标HSA蛋白的标准曲线（数据代表平均值±SD; n = 20个微珠）。

使用NaYF4:50％Yb1％Er和NaYF4:18％Yb2％Er30％Lu UCNPs编码的多色微球对靶蛋白HSA和hCRP进行多重检测。明场图像和相应的开放式过滤器和用于收集基于编码微球检测的蓝色发射过滤器的荧光图像，用于i，j，k) 不添加靶蛋白（对照）和l，m，n) 添加靶蛋白。

文章信息